麥康凱瓊脂培養(yǎng)基介紹
更新時(shí)間:2025-05-07 瀏覽次數(shù):817
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacConkey Agar,MAC)全面解析
一、基本介紹
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基是一種選擇性及鑒別性培養(yǎng)基,由Alfred Theodore MacConkey于1905年研制,主要用于腸道致病菌的分離與鑒定。其核心設(shè)計(jì)邏輯為:
- 選擇性抑制:通過膽鹽抑制革蘭氏陽性菌(如葡萄球菌、鏈球菌),但允許部分腸球菌及沙門氏菌生長; 
- 鑒別功能:利用乳糖發(fā)酵差異,通過指示劑顏色區(qū)分細(xì)菌代謝特性。 
二、核心成分與配方
| 成分 | 作用機(jī)制 | 
|---|---|
| 蛋白胨、脙胨 | 提供碳源、氮源、維生素及生長因子,支持細(xì)菌基礎(chǔ)代謝。 | 
| 膽鹽(豬/牛/羊) | 抑制革蘭氏陽性菌,但對沙門氏菌、志賀氏菌等腸道致病菌抑制較弱。 | 
| 乳糖 | 作為發(fā)酵底物,分解產(chǎn)酸(如大腸埃希菌)或不分解(如沙門氏菌)。 | 
| 中性紅 | pH指示劑,發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸時(shí)菌落呈桃紅色,并形成膽鹽沉淀環(huán)。 | 
| 結(jié)晶紫 | 增強(qiáng)對革蘭氏陽性菌(如腸球菌、葡萄球菌)的抑制,減少干擾。 | 
| 氯化鈉 | 維持滲透壓平衡,確保細(xì)菌正常生長。 | 
| 瓊脂 | 凝固劑,形成固體培養(yǎng)基表面。 | 
典型配方(每升):
- 蛋白胨 20g、乳糖 10g、氯化鈉 5g、膽鹽 5g、中性紅 0.03g、瓊脂 14g,pH 7.2±0.2。 
三、作用機(jī)制與鑒別原理
- 選擇性抑制: 
- 膽鹽破壞革蘭氏陽性菌細(xì)胞膜,抑制其生長; 
- 結(jié)晶紫進(jìn)一步增強(qiáng)對腸球菌和葡萄球菌的抑制,但沙門氏菌等腸道菌可耐受。 
- 乳糖發(fā)酵鑒別: 
- 發(fā)酵乳糖菌(如大腸埃希菌):產(chǎn)酸使菌落呈桃紅色,周圍形成膽鹽沉淀環(huán)(因酸與膽鹽反應(yīng))。 
- 不發(fā)酵乳糖菌(如沙門氏菌、志賀氏菌):菌落無色或淡黃色,無沉淀環(huán)。 
- 遲緩發(fā)酵菌(如宋內(nèi)志賀氏菌):菌落中心偏紅,邊緣無色。 
四、應(yīng)用場景
- 臨床檢驗(yàn): 
- 糞便、分泌物中腸道致病菌(沙門氏菌、志賀氏菌、致瀉性大腸桿菌)的分離; 
- 腸球菌的篩選與鑒定。 
- 科研應(yīng)用: 
- 耐藥菌株篩選(如添加壯觀霉素篩選鴨源沙門氏菌); 
- 菌株融合研究(如通過抗藥性標(biāo)記篩選融合菌株)。 
- 特殊改良配方: 
- 低鹽MAC:減少氯化鈉以抑制變形桿菌蔓延生長; 
- 山梨醇MAC:替換乳糖用于分離O157大腸埃希氏菌(不發(fā)酵山梨醇); 
- 含抗生素MAC:添加氨芐青霉素、多粘菌素B等篩選特定耐藥菌。 
五、制備方法
- 配制: 
- 稱取54g培養(yǎng)基干粉溶于1L蒸餾水,加熱煮沸至溶解。 
- 滅菌: 
- 分裝后121℃高壓滅菌15分鐘,滅菌后搖勻防止瓊脂沉積。 
- 傾注平板: 
- 冷卻至50-55℃時(shí)加入滅菌的結(jié)晶紫和中性紅溶液,混勻后傾注平板。 
六、使用注意事項(xiàng)
- 樣本處理: 
- 糞便、分泌物等可直接接種,固體樣本需稀釋后涂布。 
- 培養(yǎng)條件: 
- 35-37℃培養(yǎng)18-24小時(shí),觀察菌落顏色與形態(tài)。 
- 結(jié)果解讀: 
- 結(jié)合生化試驗(yàn)(如吲哚試驗(yàn)、氧化酶試驗(yàn))和血清學(xué)試驗(yàn)進(jìn)一步鑒定。 
- 局限性: 
- 某些特殊需求菌株(如嚴(yán)格厭氧菌)可能無法生長; 
- 需定期驗(yàn)證培養(yǎng)基性能(如接種大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌驗(yàn)證選擇性)。 
七、總結(jié)
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基通過膽鹽抑制與乳糖發(fā)酵指示,實(shí)現(xiàn)了對腸道致病菌的高效分離與鑒別。其成分可調(diào)、用途廣泛,是臨床微生物檢驗(yàn)和科研中的工具。隨著研究深入,改良配方不斷拓展其應(yīng)用場景,為微生物學(xué)研究提供了有力支持。
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